常見問題

液相色譜：二元高壓梯度與四元低壓梯度的區(qū)別！

液相色譜二元有兩個(gè)泵，高壓混合，對氣泡不敏感
四元只一個(gè)泵，低壓混合，對氣泡較敏感，須配在線脫氣機(jī)
二元高壓混合和四元低壓混合的一個(gè)重大區(qū)別就是前者進(jìn)入輸液泵后立即進(jìn)行混合而后者是進(jìn)泵以后慢慢混合，有的還要過一混合器，混合不但置后，而且效果明顯不如前者。
高壓梯度現(xiàn)在很多都可以用一個(gè)泵來控制另一個(gè)泵，而低壓梯度往往需要一個(gè)梯度控制系統(tǒng)。
幾元泵,分為高壓混合和低壓混合,高壓混合又叫泵后混合,hplc幾元泵就是幾個(gè)泵;低壓混合又叫泵前混合,其實(shí)就是一個(gè)泵,幾元就是安裝幾路電磁閥
泵，可組裝成為二元高壓梯度與四元低壓梯度兩種系統(tǒng)，兩者區(qū)別如下：
二元高壓梯度：
配置：雙泵+在線混合器
工作方式：雙泵并聯(lián)，可同時(shí)有兩個(gè)流動相，按照預(yù)先設(shè)定的配比進(jìn)入，再高壓下進(jìn)行混合，混合配比更準(zhǔn)確，不易產(chǎn)生氣泡，不用為了轉(zhuǎn)換流動相而反復(fù)清洗，提高了工作效率。同時(shí)可以做梯度洗脫，當(dāng)待測樣品成分復(fù)雜，用一個(gè)固定的流動相配比無法將樣品中成分完全分開時(shí)，就需要用到梯度洗脫，在同一個(gè)分析過程中由儀器自動改變流動相配比，將樣品中前次無法分離的物質(zhì)進(jìn)行洗脫，在同一譜圖中得到分開的峰的效果。有助于提高分析準(zhǔn)確性，避免遺漏重要物質(zhì)的檢測。
hplc四元低壓梯度：
配置：單泵+低壓梯度閥+在線脫氣機(jī)+混合器
工作方式：最多可同時(shí)有四個(gè)流動相進(jìn)入流路，按照預(yù)先設(shè)定的配比進(jìn)行混合，由于在常壓下混合所以較易產(chǎn)生氣泡，因此必須配備在線脫氣機(jī)，可消除氣泡影響。可以做梯度洗脫，在儀器上進(jìn)行設(shè)定之后，在同一樣品分析工程中，相隔一段時(shí)間后，按照用戶設(shè)定的配比自行改變流動相配比，將樣品中所有組分分離開來，有助于提高分析準(zhǔn)確性。
做簡單的分析,一般性的化合物用二元的系統(tǒng)就很好,分析如果做蛋白類,多肽等半制備或梯度洗脫還是四元系統(tǒng)方便,但需配在線脫氣機(jī).通過這些年我的經(jīng)驗(yàn),我認(rèn)為還是四元好用,如果資金沒問題的話.
所謂幾元,指的是能同時(shí)控制流路的多少.一元,二元,四元都有低壓泵.如Waters515--一元低壓,waters1515--二元低壓，HP1100--四元低壓。高壓泵多為二元，再往上做成本太高，實(shí)用性也不強(qiáng)。因?yàn)槎邏阂话憔湍軡M足廣大客戶的使用了，如watersUPLC.低壓泵通常只有一個(gè)泵，二元以上可做梯度洗脫，是先混合，經(jīng)在線脫氣機(jī)脫氣后進(jìn)泵，而高壓泵則是有幾元則有幾個(gè)泵，在泵后混合，通過流速控制配比關(guān)系，不易產(chǎn)生氣泡，但仍配有脫氣機(jī)。
二元高壓梯度流量控制精度更高，混合室在泵后，高壓下混合效率也高很多、梯度組成精確;四元低壓梯度系統(tǒng)采用單泵加梯度比例閥來實(shí)現(xiàn)，因?yàn)?a href=http://m.quanqiujishi.com/index.php?m=search&g=c&type=1&name=%E6%AF%94%E4%BE%8B%E9%98%80 target='_blank'>比例閥是在泵前的，并且各流路的溶劑在比例閥里就混合在一起了，所以是泵前、低壓混合。一般地，對于常規(guī)分析來說，四元低壓梯度也可以滿足需要;如果分析樣品成份復(fù)雜、對重現(xiàn)性要求較高，或者需要在低流量下進(jìn)行梯度分析，還是選擇高壓梯度好一些。
液相色譜從性能上比較：二元高壓肯定由于四元低壓。二元高壓的混合比例是通過改變泵的流速來獲得的，通常泵的流速都是很準(zhǔn)的，所以混合的精度也是很高的。四元低壓梯度的混合比例是通過控制不同流路的電磁閥的開閉時(shí)間長短來控制的，理論上混合的比例也是準(zhǔn)確的，但是實(shí)際上電磁閥的開閉會有一個(gè)延遲，無論它動作多么快，總還是需要一點(diǎn)時(shí)間的。比如A路和B路各50%混合，在單位時(shí)間內(nèi)，A路和B路的電磁閥各開通50%的時(shí)間，這時(shí)問題不大，電磁閥的延遲影響可以通過調(diào)整補(bǔ)償系數(shù)來盡量彌補(bǔ)。但是如果極端一點(diǎn)的情況，A路99%，B路1%，這種情況下單位時(shí)間內(nèi)，A路的電磁閥開通99%的時(shí)間，B路只占 1%，時(shí)間是很短的，這時(shí)B路電磁閥的延遲就影響很大了，甚至可能延遲的時(shí)間比工作的時(shí)間還要長，其結(jié)果可想而知。而高壓梯度就不會存在這種問題了。
從價(jià)格上比較：一般情況下，二元高壓梯度的價(jià)格會比四元低壓梯度高很多的(如果其他配置都相同的話)。
二元泵通常是指高壓梯度,四元泵指低壓梯度. 高壓是指兩個(gè)泵分別送液在泵后的混合室內(nèi)混合.而低壓是依靠電磁閥的切換使泵分段輸送不同流動相,同樣在泵后的混合室內(nèi)混合.主要區(qū)別在于低壓混合是容易產(chǎn)生氣泡.高壓則不容易產(chǎn)生氣泡.低壓應(yīng)注意清洗,尤其使用緩沖鹽時(shí),避免將電磁閥送液管路堵住.分析

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